Dentre as técnicas utilizadas pela biotecnologia moderna destacam-se a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), a hibridização in situ de ácidos nucleicos e o cultivo celular. Sobre estas técnicas, analise atentamente as afirmações I, II e III e, em seguida, assinale a alternativa CORRETA. I) O PCR é um sistema de amplificação in vitro do DNA, pelo qual se pode conseguir, em poucas horas, grandes quantidades de um gene (ou parte dele), a partir de uma quantidade muito pequena de DNA, inclusive de uma única célula. Com este processo, é possível obter os fragmentos de DNA sem o auxílio da endonuclease de restrição, e não há necessidade de utilizar a genoteca. II) O mapeamento genético pode ser realizado por meio da técnica de hibridização in situ de ácidos nucleicos. In situ, quer dizer, no local, ou na amostra obtida. Existe a possibilidade de se detectar genes diretamente nos lugares onde ocupam nos devidos cromossomos pelo método de hibridização in situ. A experiência consiste na hibridização do gene de interesse, com um DNA complementar, o qual deve levar um marcador para que possa ser identificado no tecido. Considerando o marcador para fluorescente, a técnica pode ser denominada de FISH (fluorescent in situ hybridization). III) Existem dois tipos de cultivo celular: o primário e o de linhagens estabelecidas. O cultivo primário é obtido diretamente dos animais e vegetais. O tecido é separado em condições assépticas e cortado em pequenos fragmentos tratados com tripsina. Esta enzima proteolítica dissocia os agregados celulares e gera uma suspensão de células que poderão ser cultivadas em garrafas específicas para cultivo celular, utilizando meio de cultura apropriado para cada linhagem celular. Outra forma é a colheita destas células na cavidade peritoneal de camundongos, onde é injetado e posteriormente colhido soro fisiológico para recuperação de macrófagos peritoneais. É possível reconhecer que: somente as afirmações I e II estão corretas.
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A alternativa B é a certa. A técnica de hibridização in situ de ácidos nucleicos permite a detecção de genes diretamente nos cromossomos. Ela envolve a hibridização de uma sonda de DNA ou RNA complementar a um gene de interesse, a sonda é marcada com um marcador fluorescente, o que caracteriza a técnica FISH.
Apenas a afirmativa II está certa.
O PCR é um método de amplificação in vitro do DNA que permite gerar grandes quantidades de um gene específico a partir de uma quantidade baixa de DNA, em uma única célula. Nesse processo, a enzima de restrição não é empregada, pois a amplificação ocorre por meio da replicação do DNA utilizando uma DNA polimerase termoestável.
Durante a reação, a temperatura é alternada entre diferentes estágios, incluindo desnaturação, anelamento e extensão, resultando na síntese exponencial do fragmento desejado.
O uso da enzima de restrição associada à genoteca não é necessário no PCR, uma vez que a amplificação é realizada de maneira direta, eliminando a etapa de clivagem prévia do DNA.
Por isso, a afirmativa I está incorreta.
Existem quatro tipos de cultivo celular: cultura primária, cultura secundária, linhagem celular contínua e células transformadas. Por isso, a afirmativa III está incorreta.
O cultivo primário refere-se às células diretamente retiradas de animais ou vegetais, o cultivo secundário envolve subculturas das células primárias, a linhagem celular contínua é caracterizada por alta proliferação e a capacidade de se dividir indefinidamente.
Já as células transformadas são aquelas que perderam as características do tecido original devido a modificações.
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#SPJ1
A pergunta completa é a seguinte:
Dentre as técnicas utilizadas pela biotecnologia moderna destaca-se a Reação em Cadeia da Polimerase (PCR), a hibridização in situ de ácidos nucleicos e o cultivo celular.
Sobre estas técnicas, analise atentamente as afirmações I, II e III e, em seguida, assinale a alternativa CORRETA.
É possível reconhecer que: